[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: دوره 7، شماره 4 - ( زمستان 1394 ) ::
جلد 7 شماره 4 صفحات 67-78 برگشت به فهرست نسخه ها
استخراج DNA از گونه های ماکرو جلبکی حاوی میزان بالای ترکیبات پلی ساکاریدی و فنولی جهت مطالعات ژنتیکی
کیانا پیریان، خسرو پیری، سعید تمدنی جهرمی، جلوه سهرابی پور، امیر اقبال خواجه رحیمی
دانشگاه بوعلی سینا، همدان
چکیده:   (3230 مشاهده)

استخراج DNA خالص و کافی از ماکرو جلبک‌ها به علت دارا بودن رنج وسیعی از متابولیت­های ثانویه، نحوه اشتباه نمونه­برداری و خصوصیات مرفولوژی کی آن‌ها، معمولاً مشکل است. ازآنجاکه استخراج DNA خالص جهت مطالعات مولکولی از اهمیت ویژه­ای برخوردار است این ­مطالعه باهدف استخراج آسان و ارزان DNA ژنومی باکیفیت و کمیت بالا از نمونه­های ماکرو جلبکی انجام شد. استخراج DNA توسط روش­های فنول-کلروفرم، CTAB و CTAB تغییریافته انجام شد و همچنین نیتروژن مایع جهت خرد کردن نمونه­ها حذف گردید. درروش CTAB تغییریافته، تغییراتی در نسبت حجم بافر استخراج به نمونه، ترکیبات بافر استخراج (افزایش غلظت EDTA، بتامرکاپتواتانول و افزودن PVP و سارکوسیل) ایجاد شد. واکنش PCR بر اساس ژن tufA جهت اطمینان از خلوص DNA انجام شد. در ارزیابی کمی و کیفی DNA استخراجی، نسبت 280/260 نانومتر بین 84/1-7/1 و نسبت 230/260 نانومتر بیشتر از 2 نشان داده‌شده و همچنین غلظت DNA بین 8-5/6 میکروگرم بر میکرو لیتر اندازه­گیری شد. محصولات PCR باندهایی را در محدوده 700-800 جفت باز در ژل آگارز نشان دادند. ارزیابی کمی و کیفی داده­ها، خلوص و میزان بالای DNA استخراج‌شده به روش CTAB تغییریافته نسبت به دو روش دیگر را نشان دادند، به‌طوری‌که نسبت­ها نشان­دهنده عاری بودن DNA از ترکیبات پروتئینی و پلی­فنولی/ پلی­ساکاریدی است. ازآنجاکه آلودگی­های پلی­ساکاریدی و فنولی بازدارنده آنزیم­های واکنش PCR هستند بنابراین نتایج موفقیت‌آمیز واکنش PCR نشان­دهنده خلوص DNA استخراج‌شده و کاربرد آن در مطالعات مولکولی است.DNA استخراج‌شده به روش بهینه‌شده در این مطالعه مناسب جهت مطالعات مولکولی و نگهداری است.

واژه‌های کلیدی: استخراج DNA، روش CTAB، ترکیبات پلی ساکارید و فنولی، ژن tufA، گونه های ماکروجلبک.
متن کامل [PDF 385 kb]   (4885 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: شیلات
دریافت: 1395/1/15 | پذیرش: 1395/1/15 | انتشار: 1395/1/15
ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

DNA Extraction from macroalgaespecies with high levels of polysaccharide and phenolic components for genetic studies. 3. 2016; 7 (4) :67-78
URL: http://jmb.iauahvaz.ac.ir/article-1-407-fa.html

پیریان کیانا، پیری خسرو، تمدنی جهرمی سعید، سهرابی پور جلوه، خواجه رحیمی امیر اقبال. استخراج DNA از گونه های ماکرو جلبکی حاوی میزان بالای ترکیبات پلی ساکاریدی و فنولی جهت مطالعات ژنتیکی. زیست شناسی دریا. 1394; 7 (4) :67-78

URL: http://jmb.iauahvaz.ac.ir/article-1-407-fa.html



دوره 7، شماره 4 - ( زمستان 1394 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی پژوهشی زیست شناسی دریا Journal of Marine Biology
Persian site map - English site map - Created in 0.04 seconds with 30 queries by YEKTAWEB 4319